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Perchè a cultura cellulare lisa prima i globuli rossi?

2022-12-23

Introduzione basica
U lisatu di eritrociti hè unu di i metudi più simplici è faciuli per sguassà i globuli rossi, vale à dì, per sparghje i globuli rossi cù lisati, chì ùn dannu micca e cellule nucleate è ponu eliminà cumplettamente i globuli rossi. Lisate cleavage hè un metudu ligeru di rimozione di globuli rossi, chì hè principarmenti utilizatu per a separazione è a purificazione di e cellule di tissuti disperse da a digestione enzimatica, a separazione è a purificazione di linfociti, è a rimozione di i globuli rossi in l'esperimenti di proteine tissuali è nucleiche. estrazione à l'acidu. I cellule di tissuti ottenuti da u lisatu di i globuli rossi ùn cuntenenu micca globuli rossi, è ponu esse aduprati in più per a cultura primaria, a fusione di cellule, a citometria di flussu, a separazione è l'estrazione di l'acidu nucleicu è a proteina, etc.

Istruzzioni per l'usu
Campione di cellule di tissutu
1. I tessuti freschi sò stati digeriti da pancreas / enzima o collagenase è disperse in a sospensjoni di una sola cellula, è u supernatant hè statu scartatu da centrifugazione.

2. Pigliate l'ELS lysate da a frigorifera à 4â, aghjunghje l'ELS lysate à u precipitatu di a cellula in una proporzione di 1: 3-5 (aghjunghje 3-5ml di lysate à 1ml di cellula compacted), soffiate delicatamente è mischjà.

3. Centrifuge à 800-1000rpm per 5-8 minuti è scaccià u liquidu chjaru superiore rossu.

4. A parti precipitata hè stata cullata è centrifugata cù a suluzione di Hank o a suluzione di cultura senza serum per 2-3 volte.

5, se u cracking ùn hè micca cumpletu / cumpletu pò esse ripetutu i passi 2 è 3.

6. Celle di risuspensione per esperimenti sussegwenti; Se l'RNA hè estrattu, hè megliu per fà in a suluzione preparata da u Passu 4 cù l'acqua DEPC

I globuli rossi anu un ciculu di vita assai curtu, solu 120 ghjorni, ma riproducenu u sangue assai rapidamente, è in questu casu sò particularmente capaci di a divisione cellulare, è sò e cellule di divisione più veloce di tutti, cusì sta cellula hè assai preziosa, cusì hè assai utile per a cultura di cellula. Hè assai simplice, ùn hà micca organelli in questu, solu membrani cellulari è proteini.

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