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Chì sò e funzioni di u kit ELISA?

2022-12-23

U kit ELISA hè basatu annantu à a fase solida di l'antigenu o l'anticorpu è l'etichettatura enzimatica di l'antigenu o l'anticorpu. L'antigenu o l'anticorpu ligatu à a superficia di u trasportatore solidu mantene sempre a so attività immunologica, è l'antigenu o l'anticorpu marcatu cù l'enzima conserva a so attività immunologica è l'attività enzimatica. À u mumentu di a determinazione, u specimenu sottu test (in quale l'anticorpu o l'antigenu hè misuratu) reagisce cù l'antigenu o l'anticorpu nantu à a superficia di u trasportatore solidu. U cumplessu antigenu-anticorpu furmatu nantu à u trasportatore solidu hè siparatu da l'altri sustanzi in u liquidu per lavà.

L'antigeni o l'anticorpi marcati cù l'enzima sò aghjuntu, chì si liganu ancu à u trasportatore solidu per reazione. À questu tempu, a quantità di enzima in a fase solida hè in proporzione à a quantità di sustanza in u specimen. Dopu à aghjunghje u sustrato di a reazzione enzimatica, u sustrato hè catalizatu da l'enzima per diventà prudutti di culore. A quantità di u pruduttu hè direttamente ligata à a quantità di a sustanza testata in u specimenu, cusì l'analisi qualitativa o quantitativa pò esse realizatu secondu a prufundità di u culore.

L'alta efficienza catalitica di l'enzimi amplifica indirettamente i risultati di a risposta immune, facendu l'assay altamente sensibile. ELISA pò esse usatu per determinà l'antigens, ma pò ancu esse usatu per determinà l'anticorpi.

Principi basi di u kit ELISA
Utilizà a reazione specifica di l'antigenu è l'anticorpu per cunnette l'ughjettu à l'enzima, è poi pruduce una reazione di culore trà l'enzima è u sustrato per a determinazione quantitativa. L'ughjettu di a misura pò esse l'anticorpu o l'antigenu.

Ci sò trè reagenti necessarii in stu metudu di determinazione:
â  Antigene in fase solida o anticorpu (adsorbente immune)
â¡ Antigenu o anticorpu marcatu cù l'enzima (marcatore)
⢠sustrato per l'azione enzimatica (agente di sviluppu di culore)

In a misurazione, l'antigenu (anticorpu) hè prima ligatu à u trasportatore solidu, ma mantene sempre a so attività immune, è dopu aghjunghjenu un conjugate (marcatore) di anticorpi (antigen) è enzima, chì mantene sempre a so attività immune originale è l'enzima. attività. Quandu u conjugate reagisce cù l'antigenu (anticorpu) nantu à u trasportatore solidu, u sustrato currispundente di l'enzima hè aghjuntu. Vale à dì, idrolisi catalitica o reazione REDOX è culore.

L'ombra di culore chì pruduce hè proporzionale à a quantità di antigenu (anticorpu) per esse misurata. Stu pruduttu di culore pò esse osservatu à l'occhiu nudu, u microscopiu otticu, u microscopiu elettronicu, pò ancu esse misuratu da u spettrofotometru (strumentu per l'etichetta di l'enzima). U metudu hè simplice, convenientu, veloce è specificu.

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